Натрийуретический пептид анализ

Мозговой натрийуретический пептид (натрийуретический пептид типа В, BNP, МНП) – активный гормон белковой природы; NT-proBNP – неактивный N-терминальный пептид. Оба показателя являются маркерами оценки сократительной способности миокарда. Исследование концентрации мозгового натрийуретического пептида и NT-proBNP используется для первичной диагностики сердечной недостаточности (СН), мониторинга эффективности лечебных мероприятий, уточнения прогноза вероятности возникновения осложнений и смертельного исхода. Определение уровня показателей в крови назначают в комбинации с тропонинами, ренином, креатинином, мочевиной, мочевой кислотой. Для анализа на пептиды используют гепаринизированную или EDTA плазму крови. Основным способом исследования мозгового натрийуретического пептида типа В и неактивного N-терминального пептида являются тесты на основе сэндвич-иммуноанализа. Референсные значения мозгового натрийуретического пептида составляют от 0 до 35 пг/мл, NT-proBNP – от 0 до 125 пг/мл. Срок готовности анализа от нескольких часов до суток.

Мозговой натрийуретический пептид (натрийуретический пептид типа В, BNP, МНП) – активный гормон белковой природы; NT-proBNP – неактивный N-терминальный пептид. Оба показателя являются маркерами оценки сократительной способности миокарда. Исследование концентрации мозгового натрийуретического пептида и NT-proBNP используется для первичной диагностики сердечной недостаточности (СН), мониторинга эффективности лечебных мероприятий, уточнения прогноза вероятности возникновения осложнений и смертельного исхода. Определение уровня показателей в крови назначают в комбинации с тропонинами, ренином, креатинином, мочевиной, мочевой кислотой. Для анализа на пептиды используют гепаринизированную или EDTA плазму крови. Основным способом исследования мозгового натрийуретического пептида типа В и неактивного N-терминального пептида являются тесты на основе сэндвич-иммуноанализа. Референсные значения мозгового натрийуретического пептида составляют от 0 до 35 пг/мл, NT-proBNP – от 0 до 125 пг/мл. Срок готовности анализа от нескольких часов до суток.

Мозговой натрийуретический пептид впервые был идентифицирован в мозговых клетках свиньи. У людей продукция BNP по большей части происходит в кардиомиоцитах левого желудочка. Здесь он синтезируется в виде прогормона (проМНП) в ответ на растяжение сердечной мышцы из-за её перегрузки давлением или объёмом. Под действием специфического фермента проМНП происходит расщепление на 2 соединения – активный гормон BNP и неактивный N-терминальный пептид NT-proBNP.

Мозговой натрийуретический пептид играет первостепенную роль в поддержании компенсированного состояния пациентов с начальными признаками хронической сердечной недостаточности (ХСН). В условиях пониженной фракции сердечного выброса стабилизация гомеостаза происходит путём дезактивации симпато-адреналовой и ренин-ангиотензин-альдостероновой систем, а также эндотелина. Увеличение концентрации натрийуретических пептидов ведет к вазорелаксации, снижению образования ренина и альдостерона, возникновению коллатеральных сосудов в сердце. Перечисленные эффекты обеспечивают стимуляцию диуреза, предотвращение формирования гипертрофии и фиброза миокарда.

Определение пептидов входит в рекомендации по диагностике и терапии ХСН Американской коллегии кардиологов, Европейского общества кардиологов и Общества специалистов по сердечной недостаточности. В России исследование мозгового натрийуретического пептида и неактивного N-терминального пептида NT-proBNP до недавнего времени использовалось с целью научных изысканий. Только в последние годы определение BNP и NT-proBNP стало внедряться в сферу практического здравоохранения крупных городов нашей страны.

Показания и противопоказания

Использование неактивного пептида NT-proBNP в качестве маркера сердечной недостаточности преимущественно при сопоставлении его с активным гормоном BNP. NT-proBNP имеет более продолжительное время полувыведения – 2 часа. Мозговой натрийуретический пептид существует в кровотоке всего около четверти часа. Содержание количества NT-proBNP в кровеносном русле превосходит концентрацию BNP. Неактивный пептид NT-proBNP более устойчив и сохраняется в образце плазмы при температуре 22-24 градуса в течение 72 часов. По этой причине предпочтение отдается тест-системам на исследование NT-proBNP.

Геморрой в 79% случаев убивает пациента

При выборе врачом назначения того или другого показателя необходимо учитывать, что распад мозгового натрийуретического пептида практически полностью происходит в миокарде и только 5% удаляется через почки. NT-proBNP полностью выводится организмом с мочой. В связи с этим назначение мозгового натрийуретического пептида при почечной недостаточности считается приоритетным. Анализы крови на мозговой натрийуретический пептид и NT-proBNP в ряде случаев назначают тогда, когда у пациента ещё отсутствуют какие-либо симптомы ХСН. В то же время, врачи могут располагать эхокардиографическими данными, свидетельствующими о начавшихся в сердце изменениях: гипертрофии миокарда, дисфункции левого желудочка, расширении полостей сердца.

Показаниями для исследования крови на мозговой натрийуретический пептид и NT-proBNP являются отёки, сердцебиение и снижение толерантности к физической нагрузке. Эти симптомы говорят о клинических проявлениях ХСН. Уровень пептидов в плазме возрастает по мере утяжеления стадии ХСН. Анализ крови на мозговой натрийуретический пептид используется у госпитализированных больных с ХСН для мониторинга лечебных мероприятий и проведения коррекции плана лечения.

В неотложных ситуациях в приемном покое определение мозгового натрийуретического пептида и NT-proBNP проводится для дифференциальной диагностики тяжёлой одышки. Отрицательный ответ анализа на пептиды исключает кардиальную причину симптома и позволяет врачам своевременно начать необходимое лечение в пульмонологическом отделении. Анализ на мозговой натрийуретический пептид назначают при проявлениях острого коронарного синдрома, в особенности, когда у больных по данным ЭКГ отсутствует подъём сегмента ST. Это даёт возможность оценить вероятность возникновения сердечной недостаточности, повторного некроза сердечной мышцы и смертельного исхода в течение 6-10 месяцев после острого коронарного синдрома. Противопоказаний к назначению анализа крови на мозговой натрийуретический пептид и NT-proBNP нет.

Подготовка и забор крови

Специальная подготовка к исследованию крови на мозговой натрийуретический пептид и NT-proBNP не требуется. За 1 час до взятия биоматериала необходимо прекратить физическую активность. Кровь для анализа на BNP и NT-proBNP берут из любого сосуда венозной системы. Место пункции подвергают обработке спиртосодержащим раствором. Иглой прокалывают вену, в вакуумную пробирку с фиолетовой крышечкой собирают несколько миллилитров крови. В пробирке содержится консервант – этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA). На этикетке с биологическим материалом указывают данные больного: фамилию, имя, дату и время взятия крови. Исследуемый биоматериал доставляют в биохимическую или иммунологическую лабораторию.

Существует множество способов количественного исследования мозгового натрийуретического пептида и NT-proBNP: гель-фильтрация, электрофорез, методы аффинной хроматографии и дегликозилирования, сэндвич-иммунофосфоресцентный анализ и другие. Сэндвич-иммунофосфоресцентный анализ чаще всего применяется в российских лабораториях, как так обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Для исследования используются моно- или поликлональные антитела мышей или овец. В лунки планшета иммобилизуется специфические антитела. Затем планшеты в течение получаса инкубируют и непрерывно перемешивают. Далее в лунки добавляют антиген, который образует с антителами подложки иммунное соединение. После этого добавляют раствор детекторных антител, связанных с фосфоресцентной меткой – хелатом европия, который необходим для выявления образовавшегося иммунного соединения. Планшет вновь инкубируют. В лунки вносят раствор усиления и через 5 минут на счётчике-анализаторе замеряют фосфоресценцию. Регистрируемый сигнал прибора прямо пропорционален уровню антигена в образце биоматериала.

В экстренных ситуациях с целью дифференциальной диагностики одышки в приёмном отделении крупных стационаров, врачами бригад скорой и неотложной помощи используется быстрое качественное определение неактивного N-терминального пептида методом CITO TEST NT-proBNP. Если содержание NT-proBNP в крови превышает 450 пг/мл, тест считается положительным. При соответствующих данных объективного осмотра, ЭКГ и рентгенограммы грудной клетки положительный тест с высокой степенью вероятности говорит о сердечной причине одышки. Результаты исследования крови, взятой для анализа в обычном порядке, выдаются пациенту или направляются посредством электронной почты в течение суток.

Нормальные значения

Нормальные значения мозгового натрийуретического пептида и NT-proBNP разнятся в зависимости от технологии определения и используемых реактивов. В бланке лабораторного исследования норму показателей можно найти в графе «Референсные значения». Одобренных международных стандартов до сих пор не существует. В России приняты следующие средние нормы: для BNP от 0 до 35 пг/мл, для NT-proBNP от 0 до 125 пг/мл.

С повышением возраста допустимые нормальные показатели содержания NT-proBNP в плазме увеличиваются. Для пожилых людей старше 70 лет концентрация неактивного N-терминального пептида в норме составляет 450 пг/мл. Уровень NT-proBNP немного выше у женщин, чем у мужчин. У больных, страдающих ожирением, при одинаковой степени тяжести ХСН содержание пептидов в крови ниже, чем у людей без лишнего веса. Поэтому при трактовке результатов анализов обязательно учитывается факт тучности пациентов – показатели могут оказаться ложноотрицательными.

Диагностическое значение пептидов

Мозговой натрийуретический пептид увеличивается вследствие обычной ишемии миокарда без изначально нарушенной функции левого желудочка. Транзиторный рост BNP и NT-proBNP отмечается при чрескожной внутрипросветной ангиопластике. Причиной является обратимая ишемия, которая вызывает состояние повышенного напряжения в камерах сердца. Подъем концентрации мозгового натрийуретического пептида и NT-proBNP при ХСН позволяет врачу начать раннее лечение пациентов. Назначение терапии на доклинической стадии ХСН существенно улучшает прогноз заболевания. Развитие симптомов у больных затормаживается, снижается риск возникновения сердечных «катастроф».

Исследование NT-proBNP используется для оценки кардиотоксического действия химиопрепаратов в процессе лечения рака. Повышенные показатели неактивного N-терминального пептида дают возможность диагностировать начальную стадию токсической кардиомиопатии и принять меры по предотвращению развития СН. Рост уровня мозгового натрийуретического пептида и NT-proBNP отмечается при длительной артериальной гипертензии и гипертрофической кардиомиопатии. Причиной является гипертрофия и перерастяжение левого желудочка. Увеличение концентрации пептидов отмечается при эмболии легочной артерии, первичной легочной гипертензии и аритмогенной кардиомиопатии. Повышение показателей связано с перегрузкой мышцы правого желудочка. Кроме того, повышение концентрации мозгового натрийуретического пептида встречается при миокардите, отторжении сердечного трансплантата, гипер- и гипотиреозе, гиперальдостеронизме и сахарном диабете.

Лечение отклонений от нормы

Результаты анализа на мозговой натрийуретический пептид и NT-proBNP интерпретируются только совместно с другими лабораторно-инструментальными данными, анамнезом и клиническими проявлениями заболевания. Полученные данные позволяют врачу более детально и объективно оценить состояние больного, принять решение о необходимости госпитализации, определить тактику лечения и прогноз заболевания, своевременно рекомендовать пациенту изменение образа жизни и питания.

Описание:

Мозговой натрийуретический пептид (BNP), являющийся членом семейства натрийуретических пептидов, используют в качестве маркера при диагностике сердечной недостаточности. BNP синтезируется и выделяется в кровоток в ответ на объёмную перегрузку или состояния, вызывающие растяжение желудочка сердца, с целью контроля жидкостного и электролитного гомеостаза путём взаимодействия с системой ренин-ангиотензин-альдостерон. Уровень BNP повышен у пациентов с дисфункцией левого желудочка. При этом содержание BNP в плазме крови достоверно коррелирует с функциональными классами хронической сердечной недостаточности (по классификации Нью-Йоркской ассоциации по изучению сердечных заболеваний). Определение уровня BNP в плазме крови помогает оценить степень тяжести хронической сердечной недостаточности, прогнозировать дальнейшее развитие заболевания, а также оценивать эффект проводимой терапии.

Физиологическая роль:

Приблизительно 50 лет назад было высказано предположение, касающееся эндокринной функции сердца. Было показано, что расширение предсердий приводит к увеличению натрийуреза. Позже был выделен натрийуретический пептид (НП), впоследствии названный предсердным (ANP). В 1988 г. из мозга свиньи выделили НП, схожий с ANP, который и был назван brain natriuretic peptide (BNP). Последующие эксперименты показали, что BNP продуцируется в кардиомиоцитах желудочков сердца и имеет общие с ANP периферические рецепторы. BNP синтезируется как прогормон (preproBNP). Ген BNP у человека расположен на хромосоме 1 и кодирует preproBNP из 108 аминокислот. В крови биологически активный гормон BNP, состоящий из 32 аминокислот, отделяется от N-терминального участка proBNP. Регуляция секреции BNP происходит на уровне экспрессии гена и в ответ на соответствующие стимулы может возрастать очень быстро. ProBNP имеет более длительный период полураспада (120 мин), чем циркулирующий в кровотоке BNP (20 мин), он может определяться в крови в течение нескольких дней. Ведущим стимулом синтеза и секреции НП предсердиями и желудочками является повышение давления в камерах сердца и соответственно растяжение этих камер. Нейрогормоны играют клю-чевую роль в поддержании компенсированного состояния больных с начальными проявлениями сердечной недостаточности, в первую очередь за счет сохранения почечного гомеостаза, водно-солевого равновесия и блокады ренин-ангиотензин-альдостероновой системы в условиях снижен-ного сердечного выброса. Их эффекты опосредованы такими физиологическими действиями, как: вазодилатация, торможение выработки ренина и альдостерона, снижение нагрузки на миокард, а также улучшение коллатерального коронарного кровотока. Кардиопротекторное действие BNP в условиях ишемии ассоциируется с повышением активности вторичного мессенжера — цГМФ, а также открытием митохондриальных калиевых каналов.

Клиническая значимость:

Ишемия миокарда повышает синтез и высвобождение BNP, даже в отсутствии некроза миокарда и без предшествующей дисфункции левого желудочка. Обратимая ишемия может вызвать времен-ное состояние избыточного напряжения в стенке левого желудочка, что является достаточным для повышения уровня BNP. Уровень BNP быстро и транзиторно повышался при нагрузочном тесте у пациентов со стабильной стенокардией, и степень такого повышения коррелирует с размерами зоны ишемии, которая оценивалась по данным изображений, полученных при однофотонной эмиссионной ядерной томографии. Более того, уровень BNP транзиторно повышался после чрескожной внутрипросветной коронарной ангиопластики. В ходе исследований было показано, что уровень BNP выше у пациентов с нестабильной стено-кардией, нежели у больных со стабильным течением ИБС и у здоровых людей. Величина подъема концентрации нередко коррелирует с эхокардиографическими данными о наличии локальных нарушений сократимости, но не с показателями гемодинамики, полученными при одновременной катетеризации сердца. Показано, что нарушение подвижности и повышение напряжения стенки миокарда приводит к быстрой, в течение нескольких часов, активации гена BNP. В ходе целого ряда исследований удалось подтвердить первоначальные предположения о роли BNP в качестве независимого прогностического признака по отношению выживаемости и вероятности развития сердечной недостаточности у больных с коронарным синдромом без подъема сегмента ST. Было показано, что исходный уровень BNP коррелировал с риском летального исхода, развития сердечной недостаточности и инфаркта миокарда как через 30 дней, так и спустя 10 мес после острого коронарного синдрома. Более того, связь между отсроченным риском смерти и уровнем BNP не зависела от изменений, выявляемых на ЭКГ, а также от таких факторов, как функционирование почек и наличие клинических признаков застойной сердечной недостаточности. Европейское кардиологическое общество включило тестирование на натрийуретические пептиды в свои руководства по диагностике или исключению сердечной недостаточности. Другие кардиологи предлагают использовать BNP в распределении пациентов с сердечной недостаточностью и острым коронарным синдромом по группам. Повышенные уровни BNP у пациентов с сердечной недостаточностью позволяют предвидеть прогрессирование заболевания, увеличение заболеваемости и смертности. Исследования также показывают, что среди пациентов с острым коронарным синдромом с повышенными уровнями BNP более высокий процент кардиологических осложнений и смертности после инфаркта миокарда. Использование измерения BNP при диагностике и динамическом наблюдении во время терапии пациентов с сердечной недостаточностью может уменьшить потребность в госпитализации и более дорогих исследованиях деятельности сердца.

Показания к назначению анализа:

  • Идентификация пациентов с коронарной недостаточностью.
  • Оценка степени выраженности коронарной недостаточности.
  • Направленный мониторинг и динамическое наблюдение в течение терапии пациентов с коронарной недостаточностью.
  • Диагностика дисфункций левого желудочка или сердечной недостаточности — дифференциальная диагностика у пациентов с одышкой.
  • Оценочный прогноз дисфункций левого желудочка.
  • Оценка риска возникновения вторичного острого инфаркта миокарда (ОИМ), независимый фактор риска внезапной смерти.
  • Скрининг пациентов из групп высокого риска, с асимптоматичным течением левожелудочковой дисфункции (больные сахарным диабетом, пациенты с гипертонической болезнью, перенесшие ОИМ, люди старше 50 лет).
  • Дифференциальная диагностика между легочными, сердечными и другими заболеваниями при длительном их течении.

Наиболее оправданным с клинической точки зрения представляется использование этого теста не столько для подтверждения, сколько для исключения диагноза сердечной недостаточности, поскольку тест обладает исключительно высокой отрицательной прогностической ценностью: низкий уровень имеет отрицательное предсказующее значение >90%, т. е. при нормальном уровне BNP вероятность сердечной недостаточности близка к «0».

Референсные значения:

Общая группа: 0 -100 пг/мл

Интерпретация результата:

Повышение значений.

  • Сердечная недостаточность
  • Гипертрофия левого желудочка
  • Воспалительная сердечная болезнь (миокардит, отторжение аллотрансплантата)
  • Аритмогенный правый желудочек сердца с уменьшенной фракцией выброса
  • Болезнь Кавасаки
  • Первичная легочная гипертония
  • Острая и хроническая почечная недостаточность
  • Цирроз печени с асцитом
  • Первичный гиперальдостеронизм, синдром Кушинга
  • Паранеопластичекая болезнь (мелкоклеточный рак легкого)
  • Старческий возраст.

Материал для исследования: плазма крови EDTA.

Метод определения: иммунохемилюминисценция, Abbot Architect 2000i.

Пробоподготовка: кровь берется в вакуумную пробирку с сиреневой крышкой, содержащей К2EDTA. Написать на этикетке данные пациента: Ф.И.О., дату и время взятия материала.

Температурный режим хранения и транспортировки:

Цельная кровь

Плазма EDTA

18-25°C

4 часа

4 часа

2-8°C

24 часа

24 часа

-20°C

3 мес

3 мес

Правила подготовки пациента к исследованию: специальной подготовки к исследованию не требуется.

Литература:

  1. Агеев Ф.Т., Скворцов А.А., Мареев В.Ю., Беленков Ю.Н.Сердечная недостаточность на фоне ишемической болезни сердца: некоторые вопросы эпидемиологии, патогенеза и лечения. РМЖ 2000; 8: 15-16.
  2. Андреев Д.А., Батищев П.Н.Некоторые аспекты практического использования мозгового натрийуретического пеп-тида в диагностических целях. Бюллетень НЦССХ им. А.Н.Бакулева РАМН 2004; 3: 146-155.
  3. Андреев Д.А., Мазеркина И.А., Гитель Е.Н. и др. Изменения мозгового натрийуретического пептида при лечении декомпенсации хронической сердечной недостаточности. Креативная кардиол 2007; 1-2: 136-142.
  4. Андреев Д.А., Рыкова М.С.Натрийуретические пептиды В-типа при сердечной недостаточности. Клин мед 2004; 6: 4-8.
  5. Баллезюк М.Ф., Гриненко Т.Н., Кветной И.М. Гормоны сердца в формировании сердечно-сосудистой патологии. Клин мед 2005; 11: 4-12.
  6. Бугримова М.А., Савина Н.М., Ваниева О.С., Сидоренко Б.А.Мозговой натрийуретический пептид как маркер и фак-тор прогноза при хронической сердечной недостаточности. Кардиология 2006; 1: 51-57.
  7. А. Л. Верткин, Д. Б. Сапрыгин, В. А. Мошина Мозговой натрийуретический пептид при остром коронарном син-дроме без подъема сегмента ST. Медицинский научно-практический журнал «Лечащий врач», №6. 2006.
  8. Голухова Е.З., Еремеева М.В., Полякова Э.С., Бокерия Л.А.Использование предшественников натрийуретиче ских пептидов в диагностике сердечной недостаточности ишемической этиологии до и после операции аортокоронарного шунтирования. Креативная кардиол 2004; 3: 156-161.
  9. Елисеев О.М. Натрийуретические пептиды. Эволюция знаний. Тер арх 2003; 9: 40-45.
  10. Adams K.F., Mathur V.S., Gheorghiade M. et. al.B type natriuretic peptide from bench to bedside. Am Heart J 2003; 145: 34
  11. Ala-Kopsala M., Magga J., Peuhkurinen K. et al.Molecular heterogeneity has a major impact on the measurement of circulating N-terminal fragments of A- and B-type natriuretic peptides. Clin Chem 2004; 50: 1576-1588.
  12. Anand I., Fisher L., Chiang Y. et al.Changes in brain natriuretic peptide and norepinephrine over time and mortality and morbidity in the valsartan heart fealure trial (Val-HeFT). Circulation 2003; 107: 1276-1281.
  13. Clerico A., Emdin M.Diagnostic Accuracy and Prognostic Relevance of the Measurement of Cardiac Natriuretic Peptides: A Review. Clin Chem 2004; 50: 33-50.
  14. Darbar L., Davidson N., Gilleepie N. et al.Diagnostic value of B-type natriuretic peptide concentration in patients with acute myocardial infarction. Am J Cardiol 1996; 78: 284-287.
  15. Davis M., Richards A., Nicholls M. et al.Introduction of metoprolol increases plasma B-type cardiac natriuretic peptides in mild, stable heart failure. Circulation 2006; 113: 977-985.
  16. Fleisher D., Espiner E., Richards G. et al.Rapid assay of plasma brain natriuretic peptide in the assessment of acute dyp-noea. NZ Med J 1997; 110: 71-74.
  17. The Criteria Committee of the New York Heart Association. Nomenclature and criteria for diagnosis of diseases of the heartand great vessels. 9th ed. Boston, Mass: Little, Brown & Co; 1994:253-6.
  18. American Heart Association. 2000 Heart and Stroke Statistical Update.Dallas, TX: American Heart Association;1999:18-19.

И.Н. Федотова (1), А.А. Белопольский (2), Н.В. Стуров (3)

(1) НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского, Москва
(2) РМАПО, Москва
(3) РУДН, Москва

В данной работе рассматриваются вопросы предикторной роли натрийуретического пептида (NT-proBNP) в развитии острого коронарного синдрома (ОКС) и хронической сердечной недостаточности (ХСН).

Ключевые слова: натрийуретический пептид, NT-proBNP, дисфункция миокарда, экспресс-диагностика.

Сведения об авторе:
Белопольский Александр Александрович – д.м.н., кафедра общей патологии и патофизиологии РМАПО, Москва

I.N. Fedotova (1), A.A. Belopolsky (2), N.V. Sturov (3)

(1) N.V.Sklifosovsky SRI for Emergency Care, Moscow
(2) RMAPE, Moscow
(3) PFUR, Moscow

Keywords: natriuretic peptide, NT-proBNP, myocardial dysfunction, express diagnostics.

===

Применение лабораторного критерия NT-proBNP позволяет объективно диагностировать дисфункцию миокарда с высокой аналитической чувствительностью и специфичностью. Он принадлежит к семейству натриуретических пептидов (НП), состоящему из ANP (А тип), BNP (B тип) и СNP (С тип). ANP и BNP являются антагонистами ренин-ангиотензин-альдостероновой системы и позволяют оценить натриуретические, диуретические изменения электролитного и водного баланса в организме .

История открытия семейства НП

В начале XX века было высказано предположение об эндокринной функции сердца и было показано, что расширение предсердий вызывает натрийурез. Применение электронной микроскопии выявило внутриклеточные гранулы в миоцитах предсердий, похожие на гранулы эндокринных клеток. В 1981 г. в экспериментах на крысах было показано, что введение экстрактов предсердных миоцитов крысам вызывает натрийурез и диурез. Позже было установлено, что активным фактором является предсердный натрийуретический пептид (ANP) . В 1985 году были обобщены данные по эндокринной функции сердца, в которой рассматривалась роль ANP как гормонального фактора, регулирующего водно-электролитный гомеостаз и артериальное давление. В 1988 г. из мозга свиньи был выделен НП, похожий на ANP, который был назван мозговым натрийуретическим пептидом (BNP). Эксперименты показали, что BNP продуцируется в кардиомиоцитах, и имеет общие периферические рецепторы с ANP. В последующем был выявлен третий НП, названный CNP, который продуцируется в мозге и эндотелии и не секретируется кардиомиоцитами .

Физиологическая роль NТ-proBNP

BNP синтезируется в кардиальных миоцитах и кардиальных фибробластах как прогормон. Под влиянием соответствующих стимулов к высвобождению НП расщепляются и поступают в циркулирующую кровь в виде гормонально активных пептидов – С- и N-концевых фрагментов, где присутствуют в эквивалентных концентрациях. В результате расщепления НП в почках образуется уродилатин с ауто-паракринной активностью. Ген BNP у человека находится в 1 хромосоме, кодируя прогормон (proBNP) из 108 аминокислот. Циркулирующий в крови биологически активный гормон BNP состоит из 32 аминокислот, и отделен от N-терминального участка прогормона NT- proBNP. ProBNP состоит из 180 аминокислотных остатков, секретируется преимущественно в желудочках, при этом образуется физиологически активный BNP (77–108) и гормонально не активный NT-proBNP (N-terminal fragment, 1-76) .

В настоящее время окончательно не ясен точный механизм, контролирующий уровень BNP в плазме крови. Наиболее вероятно, что ведущим стимулом синтеза-секреции НП предсердиями и желудочками является повышение растяжимости миокарда и давления в камерах сердца. Связывание НП со своими специфическими рецепторами опосредуют свои физиологические эффекты: диурез, вазодилатацию, торможение выработки ренина и альдостерона.

Основным механизмом НП клиренса является путь ренальной экскреции (основной для NT-pro BNP и в меньшей степени BNP). Удаление из плазмы крови происходит путем связывания с рецепторами С типа с последующим эндоцитозом и лизосомальной деградацией за счет протеолиза пептидазами. Наиболее изученной пептидазой считается нейтральная эндопептидаза – цинк содержащий эндофермент, который отсутствует в плазме крови и обнаруживается на апикальном полюсе эпителиальных клеток проксимальных канальцев нефрона, в легких и эндотелии сосудистой стенки. Подавление этого фермента может быть регулятором уровней НП в крови .

Определение NT-proBNP

Изначально уровень NT-proBNP определялся радиоиммунным методом с использованием специфической антисыворотки кролика для N-терминального участка proBNP (1–31 аминокислоты) или человеческий N-терминальный фрагмент proBNP (1–21). В настоящее время наиболее точным является стандартный электрохемилюминесцентный метод тест-системами на иммунохимических анализаторах линии Elecsys (Roche Diagnostic GmbH, Mанхайм, Германия). Тест-система содержит два поликлональных антитела к определенным эпитопам, локализующиеся в N-терминальной части (1–76) proBNP (1–108). Около 90–100% измеряемой концентрации находится в пределах 2-х сигм с аналитической чувствительности с коэффициентом корреляции >0,95. Минимально детектируемая концентрация (нижний предел определения) составляет 5 пг/мл. Аналитическая специфичность теста определяется в пределах 300–3000 пг/мл. Функциональная чувствительность или концентрация аналита, которая может быть измерена в пределах коэффициента вариации 20% составляет <50 пг/мл. Перекрестные реакции с субстанциями – адреномедуллин, альдостерон, ангиотензин 1, ангиотензин 2, ангиотензин 3, ANP, вазопрессин, BNP, CNP, эндотелин, NT-proANP, ренин, уродилатин – отсутствуют. Аналит NT-proBNP отличается высокой стабильностью, и сохранен при температуре 20–25ºС в течение 3 дней, 2–8ºС – 6 дней и при 20ºС – 12 месяцев и после 5 замораживаний. На анализ не влияет основные преаналитические дефекты сыворотки крови (гемолизность иктеричность, хилезность). Тест-система позволяет определять концентрацию NT-proBNP в сыворотке и в гепаринизированной плазме.

Наиболее предпочтительным для оценки семейства НП является определение NT-proBNP перед BNP. Это обусловлено высокими концентрациями в крови в связи с большим молекулярным весом, что обеспечивает легкое детектирование NT-proBNP на ранних стадиях нарушения функции миокарда и диастолических дисфункций. В то же время низкий уровень BNP не позволяет диагностировать ХСН на ранних стадиях и высоких функциональных классов сердечной недостаточности. Высокая аналитическая стабильность в кровотоке, отсутствие гормональной активности, низкая аналитическая (1,6%) и биологическая вариабельность (33%) позволяет измерять NT-proBNP с высокой аналитической точностью. Гормон BNP больше подвержен циркадным ритмам, что связано с его коротким периодом полувыведения – 20 мин, в отличие от NT-proBNP, 1–2 ч. Зависимость концентрации в крови от суточных колебаний BNP позволяет оценить состояние миокарда только в момент определения, и она быстро меняется в зависимости от состояния и функции левого желудочка. Кумулятивный уровень NT-proBNP отражает функцию миокарда в целом, его концентрация в крови коррелирует со степенью нарушения сердечной функции, то есть позволяет более объективно оценить стадию заболевания и прогноз, а также применяться с целью длительного мониторинга заболевания. Уровень NT-proBNP в крови пациентов не зависит от проводимой терапии, а концентрация BNP зависит от терапии натрексоном .

Клиническое значение NT-proBNP

Активность маркера учитывается в диагностике степени миокардиальной дисфункции в широком диапазоне: от клинически бессимптомных легких форм до декомпенсированной стадии ХСН, а также в оценке изменения ее тяжести под воздействием лечения . ХСН – клинический синдром, который связан с недостаточной насосной функции сердца из-за ишемии миокарда. Уменьшение притока крови в сосудистую сеть сердца вследствие ишемии приводит к уменьшению кровоснабжения органов и систем, и является пусковым механизмом для развития полиорганной или моноорганной недостаточности.

Уровень NT-proBNP позволяет оценить неблагоприятный прогноз у пациентов с ХСН, а также мониторировать чувствительность пациентов с дисфункцией левого желудочка (ДЛЖ) к проводимой терапии . Эта дисфункция развивается вследствии ИБС, артериальной гипертензии, клапанной кардиопатии и заболеваний миокарда, а ее прогрессирование всегда связано с высоким риском летальности, в том числе внезапной. Диагностическое значение НП в оценке нарушения функции сердечно-сосудистой системы связанной с ДЛЖ в настоящее время считается доказанным . Тест позволяет дифференцировать симптомы кардиального происхождения и идентифицировать пациентов с ДЛЖ. Европейская Ассоциация кардиологов (TackForce) рекомендует НП, включая NT-proBNP, для диагностики и оценки риска неблагоприятных прогнозов (исходов) . У пациентов с ДЛЖ и острым коронарным синдромом (ОКС) повышенная концентрация в крови НП является негативным прогностическим критерием . В течение 1 года вероятность летальности составляла 53% у пациентов декомпенсированной ХСН, при неустановленном прогнозе – 11% . При рекомендованной оценке прогнозов с помощью NT-proBNP теста неблагоприятные прогнозы выявляются в 97–100% случаев . Изменение уровня NT-proBNP позволяет оценить эффективность терапии у пациентов ДЛЖ, а также процесс сосудистого ремоделирования в индивидуальном реабилитационном периоде. Исследования GUSTO IV, включившие обследование более чем 6800 пациентов ОКС, показали, что NT-proBNP является независимым предиктором летальности в течение 1 года .

Интерпретация результатов NT-proBNP

При интерпретации уровня NT-proBNP необходимо рассматривать суммарно анамнестические, клинические и лабораторные данные, а также учитывать терапевтические эффекты и референтные диапазоны. Следует также учитывать возраст, поскольку у пожилых пациентов отмечается повышенный уровень гормона, что связано с возрастной дисфункцией сердца вследствие фиброза и пол, так как концентрация для мужчин NT-proBNP 93 пг/мл и 144 пг/мл для женщин позволяет надежно исключить сердечную недостаточность с 97% клинической специфичностью .

Для стандартной диагностики наиболее приемлемым является уровень порогового решения (cut-off) 125 пг/мл, поскольку исключается зависимость от пола. Основываясь на клинических исследованиях, был разработан следующий упрощенный алгоритм для исключения ХСН у пациентов с клиническими симптомами. Сердечная недостаточность маловероятна при уровне NT-proBNP <125 пг/мл, считаемым нормальным, и нарушения функции сердца могут быть исключены с высокой вероятностью (клиническая специфичность 97%). При уровне >125 пг/мл сердечная недостаточность вполне вероятна, что отражает наличие или развитие нарушений функции сердца и ассоциируется с повышенным риском сердечных осложнений .

При интерпретации уровня NT-proBNP следует учитывать, что критерий позволяет дифференцировать нормальную функцию сердца от дисфункции, развитие которой индивидуально и бессимптомно на начальных стадиях. Повышение уровня маркера может отмечаться при атеросклерозе и фиброзе сердца с исходом в дисфункцию миокарда.

NYHA различает четыре класса ХСН. Когда пациентов с ХСН группировали по классам, ориентировались на уровень NT-proBNP и степень кардиальной дисфункции. Корреляции NT-proBNP с NYHA классификацией у пациентов с диагностированной ХСН и с рестриктивным левым желудочковым типом кровотока (преобладает после терапии) представлены в табл. 1.

В исследовании ICON (International Collaborative of NT-proBNP) был проанализирован уровень NT-proBNP в крови пациентов с диспноэ в зависимости от наличия обострения ИБС. Исследования проводились в образцах крови 1256 пациентов, в анамнезе которых были гипертензия, болезнь коронарных артерий, миокардиальный инфаркт, стенокардия или болезнь легких, и лечившихся дома по поводу остро возникшей стенокардии, обратившихся в департамент и позднее госпитализированных. Вторая группа включала 720 пациентов с обострением ИБС, клинически выраженной в виде одышки (табл. 2) . Результаты табл. 2 показывают необходимость интерпретации уровня NT-proBNP у пациентов с острой одышкой в зависимости наличия обострения ИБС.

Экономическая эффективность применения NT-proBNP

По данным отечественных и зарубежных авторов было показано, что практическое применение тестов на определение НП позволяет снизить стоимость обследования больных ХСН, позволяя достаточно точно диагностировать наличие или отсутствие ДЛЖ до проведения УЗИ сердца. Несмотря на то, что Эхо-КГ долгое время являлась «золотым стандартом» в диагностике систолической дисфункции, необходимо отметить, что данный метод является дорогостоящим, не всегда доступен и имеет ряд ограничений, в частности в диагностике неотложных состояний. В исследованиях по сравнению NT-proBNP и Эхо-КГ была показана их сопоставимая клиническая эффективность. При этом средние затраты по мониторированию НП оказались ниже.

Клинический пример

Больной М., 49 лет, поступил в кардиореанимацию с диагнозом скорой помощи «нестабильная стенокардия». Причиной вызова послужили интенсивные давящие загрудинные боли в покое, возникшие в день поступления, продолжительностью до 15 мин с небольшими перерывами до 1–2 часов, со слабым эффектом от нитроглицерина. В анамнезе в течение последних месяцев типичная стенокардия. Последние 5 лет страдает артериальной гипертонией, корригируемой монотерапией. На догоспитальном этапе была выполнена ЭКГ, где изменений выявлено не было. При поступлении в стационар ЧДД 18/мин., ЧСС78/мин., АД 160/80 мм.рт.ст., на ЭКГ ритм синусовый, признаки гипертрофии миокарда левого желудочка. Был поставлен диагноз «ИБС, острый коронарный синдром без подъема сегмента ST. Артериальная гипертония». В биохимическом анализе крови КФК при поступлении – 154 Е/л, на следующие сутки – 287 Е/л (норма до 280 Е/л), тропонин Т через 6 часов от начала болевого синдрома 0,05 нг/мл, через 14 часов 0,08 нг/мл (норма до 0,1 нг/мл). NT-proBNP на 3 сутки 3890 пг/мл, на 7 день 2950 пг/мл (норма до 125 пг/мл). Выявленные показатели NT-proBNP свидетельствовали о высоком риске неблагоприятного исхода, связанном с обострением ИБС на фоне отсутствия лабораторных данных за некроз миокарда. По данным эхокардиографии была выявлена гипертрофия миокарда левого желудочка, признаки диастолической дисфункции левого желудочка I типа, фракция выброса 68%, зон с нарушенной локальной сократимостью не обнаружено.

В связи с тем, что болевой синдром не рецидивировал, уровень тропонина в норме, на ЭКГ не отмечалось отрицательной динамики, больному был поставлен диагноз «ИБС, прогрессирующая стенокардия. Артериальная гипертония. Группа низкого риска по TIMI». Состояние больного было стабильным, ангинозные боли не рецидивировали, одышка не беспокоила, нормальные цифры АД и ЭКГ-признаки без динамики. Через 4 суток больной был переведен в кардиологическое отделение. На 11-е сутки заболевания у больного в утреннее время развился тяжелый ангинозный приступ, в связи с чем был переведен в кардиореанимацию. При поступлении состояние тяжелое: гипотония (АД 90/60 мм.рт.ст.) с болевым синдром. На ЭКГ ритм синусовый, ЧСС 95/мин., подъем сегмента ST в отведениях V1–V4 и депрессия ST в III, aVF отведениях. Во время проведения тромболитической терапии возникли реперфузионные нарушения ритма, фибрилляция желудочков, в связи с чем проводилась интенсивная терапия. В дальнейшем течение заболевания осложнилось развитием острой аневризмы левого желудочка с пристеночным тромбозом, нарушением систолической функции левого желудочка и снижением фракции выброса до 36%, пароксизмальной формой мерцательной аритмии. На 20-е сутки констатирован рецидив острого ИМ, подтвержденный лабораторным анализом. На 22-е сутки наступил летальный исход от наружного разрыва миокарда, что было подтверждено секционными данными.

Данный клинический пример показывает, что повышение уровня NT-proBNP в 30 раз выше нормы являлось прогностически значимым в отношении неблагоприятного исхода. При отсутствии ХСН в анамнезе данный уровень маркера соответствовал обострению ИБС. Своевременная оценка концентрации NT-proBNP позволила предсказать неблагоприятный исход для пациента.

Таким образом, определение NT-proBNP-теста при ОКС и ХСН целесообразно в клиническом и экономическом аспектах. Клинические преимущества использования теста состоят в возможности скрининга ХСН на ранних стадиях, оценивать риск и прогноз с высокой аналитической точностью. Интерпретация уровня НП в крови относительно пола, возрастной нормы, наличие/отсутствие ХСН в анамнезе, позволяет объективно оценить значимость изменений и предотвратить неблагоприятный прогноз. Применение экспресс систем NT-proBNP является эффективным в неотложной медицине в связи с аналитической простотой и отсутствием специальной подготовки пробы. Тест позволяет снизить количество ложных результатов при использовании других диагностических методов, следовательно, способствует повышению точности диагностики.

Литература

Leave a Comment